新闻和观点：熟悉Covid-19腺病毒 - 复制缺陷疫苗

虽然美国即将拥有一种新型COVID-19疫苗，但强生(Johnson & Johnson)的腺病毒复制缺陷疫苗不会是首个获批的此类疫苗。事实上，截至2021年2月中旬，已有11种COVID-19疫苗获批用于世界不同地区，其中4种基于腺病毒平台。事实上，以腺病毒为基础的疫苗目前正在大约70个国家分发。所以，让我们仔细看看这种疫苗，到目前为止，它被广泛研究以对抗多种病原体，但很少被批准。具体来说，在COVID-19腺病毒疫苗获批之前，只有另一种腺病毒疫苗获批使用——两剂埃博拉疫苗，其中第一剂是腺病毒载体，第二剂是重组疫苗。埃博拉疫苗于2020年7月获得欧盟委员会批准。此外，强生公司生产的预防埃博拉病毒的腺病毒疫苗在1岁以下的儿童中获得批准。

Covid-19基于腺病毒的疫苗

提交批准的疫苗由Johnson＆Johnson批准使用人类腺病毒，其中大多数人口没有豁免权，称为腺病毒26（AD26）。与Covid-19 mRNA疫苗一样，该疫苗针对SARS-COV-2刺蛋白。在俄罗斯生产的Sputnik V疫苗使用AD26（剂量1）和AD5（剂量2）载体病毒。

AstraZeneca疫苗和印度制造的相同一个称为Covishield，使用Chimpanzee腺病毒，称为Chadox1。另一种基于腺病毒的疫苗在中国生产，依靠人腺病毒5（AD5）。AD5是感染人最常见的类型，因此研究人员需要平衡其在一些人群中产生高水平预先存在的免疫应答的能力。这些担忧往往是科学家选择使用其他类型的腺病毒的原因，这不太频繁或永不感染人。

强生公司的疫苗已提交给美国食品和药物管理局(FDA)考虑作为单剂疫苗;然而，正在进行的研究将评估在第一次注射56天后再注射第二剂的效用。在目前批准在其他国家使用的疫苗中，阿斯利康和Covishield分别在0天和28天服用两剂。Sputnik V在第0天和第21天分两次注射，而中国生产的CanSino疫苗则是单次注射。全部采用肌肉注射。

制造腺病毒载体疫苗

最常用的是用作疫苗载体，腺病毒是复制缺陷的，这意味着它们不能在疫苗接受者中繁殖。这是通过去除腺病毒需要再现和替换其对感兴趣蛋白质的基因来实现的 - 在这种情况下，SARS-COV-2刺蛋白。

由于病毒需要细胞来繁殖并且改变的病毒无法繁殖，科学家需要一种方法来制造大量的改变的疫苗病毒。通常使用已被修改的细胞系包括包括从腺病毒中除去的基因的细胞系来完成。虽然有一些选择可用，但两个最常见的是：

• hek - 293- 这种人胚胎肾细胞系最初于1972年孤立，被改变为20世纪70年代后期的腺病毒繁殖基因。虽然一个流行的选择，有时，这种细胞系允许生产少量的腺病毒，这些腺病毒已经恢复了繁殖的能力。由于研究人员意识到这种趋势，他们可以检查它，并于2001年，FDA开发了标准化可以存在于样本中的活病毒量的指导方针。但是，为了避免这种问题，一些公司选择使用不同的细胞系。
• 每。C6- 最初是1985年最初分离的这种细胞系列的最受欢迎的替代方案是从20世纪90年代后期的人类胚胎视网膜细胞开发的。虽然这些细胞不太可能恢复复制的能力，但这仍然可以在偶尔发生，但是是一个问题。然而，这种细胞系列旨在克服自己的问题，包括更严格和更昂贵的许可以及适应无血清文化的生长。

无论使用哪种细胞系，一旦种植大量的病毒，疫苗病毒通过一系列步骤纯化在制备用于分布之前。在批准（或提交）Covid-19疫苗方面，约翰逊和约翰逊使用了Per.C6细胞;所有其他人使用HEK-293。

由于基于腺病毒的疫苗在生产过程中使用胎儿细胞，因此一些人可能不愿意接受这些类型的疫苗。与Covid-19疫苗情况的好消息是，与依赖于生产过程中胎儿细胞的一些其他疫苗不同，替代疫苗的可用性将使人们能够保护侵害Covid-19，即使它们不舒服地接受疫苗使用胎儿细胞。

的作用机制

腺病毒进入肌肉细胞和免疫系统细胞，两种细胞都产生病毒蛋白，导致免疫系统细胞直接加工刺突蛋白，被感染的肌肉细胞激活免疫系统细胞。免疫反应的某些部分也可能发生在较远的部位，如脾脏。

与mRNA疫苗不同，腺病毒疫苗通过DNA传递指令。这种差异意味着，当以DNA为基础的腺病毒载体被运送到细胞时，DNA会进入细胞核，在细胞核中，它作为生成信使rna的蓝图，信使rna被释放到细胞质中。然后，mRNA被用来引导冠状病毒刺突蛋白的产生，最终由免疫系统细胞加工产生免疫。

DNA的交付决定了两个重要的考虑因素：

1. 遗传的影响——听到DNA进入细胞核的消息，自然会让一些人怀疑疫苗是否会引起基因变化。好消息是它不能。腺病毒在感染过程中不会被整合到我们的DNA中，因为它们不包含整合酶，整合酶是整合所必需的。所以，即使DNA在细胞核中，它也不会与我们的DNA混合或改变。事实上，我们一直被腺病毒等DNA病毒感染。这些相遇不会导致我们的DNA发生改变。
2. 长寿- 虽然MRNA在细胞中相对较快地分解，但DNA并不像快速移除。这种情况解释了疫苗接种后随后的几周增加的免疫应答，以及这些疫苗可以作为单剂量给出的原因。因为DNA继续使mRNA产生mRNA，所以细胞产生尖峰蛋白，这意味着免疫系统暴露于抗原以更长的时间。结果，免疫应答在此长时间内有时间成熟和加强。在I阶段，Johnson＆Johnson的研究，大多数参与者在疫苗接种后两周内的大多数参与者检测到免疫应答，但疫苗接种后一个月甚至更具可检测的反应。类似地，18至55岁的成年人具有更高的平均抗体滴度，包括中和抗体，与疫苗接种后1个月的疫苗接种疫苗后两个月大约。

免疫应答

腺病毒载体疫苗刺激先天和适应性免疫应答，包括T细胞和B细胞应答，包括内存的产生。此外，发展涉及通常遵循病毒感染的T细胞反应的类型，称为TH1反应。结果，预计疫苗诱导的免疫力是稳健的;但是，与mRNA疫苗试验中的那些一样，将继续监测试验参与者。

也很重要的是要认识到，除了产生对SARS-COV-2刺蛋白蛋白的免疫之外，可能还可能对腺病毒载体蛋白产生免疫。如果额外的疫苗使用相同的载体，则这意味着随着时间的推移是什么。鉴于具有预先存在的AD5的人对患有这种骨干的疫苗具有较低的免疫应答，未来疫苗可能有类似的发现。或者，关注可特异于AD5，这是通过在接收到基于AD5的HIV疫苗后，通过评估男性的HIV易感性增加的数据提出。因此，有些建议AD5向量不应用于Covid-19疫苗开发。